Vergleichsergebnisse
Protein Array
ohne mit
LowCross-Buffer® LowCross-Buffer®
(Daten zur Verfügung gestellt von Dipl.-Chemiker N. Dankbar, Universität Münster)
ohne mit
LowCross-Buffer® LowCross-Buffer®
(Daten zur Verfügung gestellt von Dipl.-Chemiker N. Dankbar, Universität Münster)
Reduktion des Backgrounds
Verschiedene Antikörper gegen einen identischen Zielanalyten auf einem Slide gespottet
Signal/Rausch Verhältnis ohne LowCross-Buffer®: 3,42 mit LowCross-Buffer®: 17,26
ELISA
(Daten zur Verfügung gestellt von Dr. C. Specht, PARA Bioscience GmbH, Gronau)
(Daten zur Verfügung gestellt von Dr. C. Specht, PARA Bioscience GmbH, Gronau)
Verhindern falsch-positiver Bindungen durch LowCross-Buffer® bei einem ELISA gegen Meerschweinchen -IgG
Spezifitätskontrolle Reihe A1-12
Leerwertkontrolle Reihe H1-12
Spezifitätskontrolle Reihe A1-12
Leerwertkontrolle Reihe H1-12
HAMA-ELISA
Abb.1: HAMA Serum
Abb.2: Rheuma Serum
Abb.3: HAMA Seren
In Abb. 3 ist die Wirkung von LowCross-Buffer® auf komplette kommerziell erhältliche Seren-Panel der Firmen in.vent, Berlin und Scantibodies, USA gezeigt.
Hierbei sind alle Daten der HAMA-Seren gezeigt, die laut HAMA-ELISA positiv reagieren. LowCross-Buffer® konnte ausnahmslos in allen Seren den Störeffekt durch HAMAs vollständig eliminieren
(Signal unterhalb 40ng/ml laut Herstellerangaben).
Abb.1: HAMA Serum
Abb.2: Rheuma Serum
Abb.3: HAMA Seren
In Abb. 3 ist die Wirkung von LowCross-Buffer® auf komplette kommerziell erhältliche Seren-Panel der Firmen in.vent, Berlin und Scantibodies, USA gezeigt.
Hierbei sind alle Daten der HAMA-Seren gezeigt, die laut HAMA-ELISA positiv reagieren. LowCross-Buffer® konnte ausnahmslos in allen Seren den Störeffekt durch HAMAs vollständig eliminieren
(Signal unterhalb 40ng/ml laut Herstellerangaben).
HAMAs und Rheumafaktoren:
Das CE-gekennzeichnete Diagnostikum "HAMA-ELISA" (Medac, Wedel) wurde genutzt, um die Wirkung auf kommerziell erhältliche HAMA-Seren und Rheumafaktor-Seren (in.vent, Berlin) zu messen.
Dabei wurden die Seren parallel im mitgelieferten Assay-Puffer oder in LowCross-Buffer® gemessen.
In Abb. 1 und Abb.2 sind exemplarisch die Original-Ergebnisse von zwei Seren gezeigt. Dabei handelt es sich zum Einen um ein Serum, das humane Anti-Maus-Antikörper (HAMA) enthält und zum Anderen um ein Patientenserum, das störende Rheumafaktoren enthält.
Das CE-gekennzeichnete Diagnostikum "HAMA-ELISA" (Medac, Wedel) wurde genutzt, um die Wirkung auf kommerziell erhältliche HAMA-Seren und Rheumafaktor-Seren (in.vent, Berlin) zu messen.
Dabei wurden die Seren parallel im mitgelieferten Assay-Puffer oder in LowCross-Buffer® gemessen.
In Abb. 1 und Abb.2 sind exemplarisch die Original-Ergebnisse von zwei Seren gezeigt. Dabei handelt es sich zum Einen um ein Serum, das humane Anti-Maus-Antikörper (HAMA) enthält und zum Anderen um ein Patientenserum, das störende Rheumafaktoren enthält.
ELISA
(Daten von Dr. P. Rauch, CANDOR Bioscience GmbH)
(Daten von Dr. P. Rauch, CANDOR Bioscience GmbH)
Verringerung des VK
Ein Störeffekt aus dem hier verwendeten humanen Plasma führte mit PBS/BSA Tween zu einem hohen Variationskoeffizienten (n=96, ermittelt über den gesamten Messbereich).
Der VK wird durch die Verwendung von LowCross-Buffer® aufgrund der Aufhebung des Störeffektes deutlich verringert.
Hierdurch konnten die Kriterien der "Guidance for Industry - Bioanalytical Method Validation" der FDA erfüllt werden. Diese fordert u.a. für Richtigkeit und Präzision maximal 15%.
Ein Störeffekt aus dem hier verwendeten humanen Plasma führte mit PBS/BSA Tween zu einem hohen Variationskoeffizienten (n=96, ermittelt über den gesamten Messbereich).
Der VK wird durch die Verwendung von LowCross-Buffer® aufgrund der Aufhebung des Störeffektes deutlich verringert.
Hierdurch konnten die Kriterien der "Guidance for Industry - Bioanalytical Method Validation" der FDA erfüllt werden. Diese fordert u.a. für Richtigkeit und Präzision maximal 15%.
ELISA
ohne LowCross-Buffer® mit LowCross-Buffer®
(Daten zur Verfügung gestellt von Dr. Ch. Specht, PARA BioScience GmbH, Gronau)
ohne LowCross-Buffer® mit LowCross-Buffer®
(Daten zur Verfügung gestellt von Dr. Ch. Specht, PARA BioScience GmbH, Gronau)
Bessere Sensitivität
(LOD von 0,051 auf 0,022 und LOQ von 0,152 auf 0,065 gesenkt, bei gleichzeitig nach oben vergrößertem Messbereich) Aufhebung der Kreuzreaktivität der Präimmunseren, Reduktion des Backgrounds.
Antigen gecoated, serielle Verdünnungen von vier Immunseren (1:50 bis 1:36450) A-G, entsprechende Präimmunseren in H Leerwert: Spalte 5
(LOD von 0,051 auf 0,022 und LOQ von 0,152 auf 0,065 gesenkt, bei gleichzeitig nach oben vergrößertem Messbereich) Aufhebung der Kreuzreaktivität der Präimmunseren, Reduktion des Backgrounds.
Antigen gecoated, serielle Verdünnungen von vier Immunseren (1:50 bis 1:36450) A-G, entsprechende Präimmunseren in H Leerwert: Spalte 5
ELISA
(Daten zur Verfügung gestellt von M. Braun, PD Dr. H.-P. Wendel, Klinik für Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, Forschungslabor Universitätsklinikum Tübingen)
(Daten zur Verfügung gestellt von M. Braun, PD Dr. H.-P. Wendel, Klinik für Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, Forschungslabor Universitätsklinikum Tübingen)
Reduktion des Backgrounds
Der mit alkalischer Phosphatase gekoppelte Detektorantikörper bindet unspezifisch an den Fängerantikörper in Abwesenheit des Analyten.
LowCross-Buffer® verhindert diese unspezifische Bindung, der Background des Assays wird so stark reduziert.
Der mit alkalischer Phosphatase gekoppelte Detektorantikörper bindet unspezifisch an den Fängerantikörper in Abwesenheit des Analyten.
LowCross-Buffer® verhindert diese unspezifische Bindung, der Background des Assays wird so stark reduziert.
ELISA
(Daten zur Verfügung gestellt von A. Zellmer, Dr. P. Rauch, CANDOR Bioscience GmbH)
(Daten zur Verfügung gestellt von A. Zellmer, Dr. P. Rauch, CANDOR Bioscience GmbH)
Aufhebung eines Matrixeffektes
Matrixeffekt beim Nachweis von CRP (c-reaktives Protein) in Kaninchen-Blutplasma. Matrixproteine im Plasma maskieren den Analyten CRP.
LowCross-Buffer® hebt diese Maskierung auf und verbessert so die Nachweisgrenze um den Faktor 3.
Matrixeffekt beim Nachweis von CRP (c-reaktives Protein) in Kaninchen-Blutplasma. Matrixproteine im Plasma maskieren den Analyten CRP.
LowCross-Buffer® hebt diese Maskierung auf und verbessert so die Nachweisgrenze um den Faktor 3.
Western Blot
(Daten zur Verfügung gestellt von Dr. D. Sperling, MACHEREY-NAGEL, Düren)
(Daten zur Verfügung gestellt von Dr. D. Sperling, MACHEREY-NAGEL, Düren)
Nachweis der Cytokeratine 4, 5 und 6.
LowCross-Buffer® konnte die Cytokeratine 4,5 und 6 deutlich zwischen 56 und 60 kDa detektieren und unerwünschte Bindungen vollständig verhindern.
Spur 1 und 1' Detektion aus Leberzellen
Spur 2 und 2' Detektion aus HeLa-Zellen
LowCross-Buffer® konnte die Cytokeratine 4,5 und 6 deutlich zwischen 56 und 60 kDa detektieren und unerwünschte Bindungen vollständig verhindern.
Spur 1 und 1' Detektion aus Leberzellen
Spur 2 und 2' Detektion aus HeLa-Zellen
Immuno-PCR
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7
(Daten zur Verfügung gestellt von A. Fischer, PD Dr. K. Becker, Institut für Medizinische Mikrobiologie, Universitätsklinikum Münster)
1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7
(Daten zur Verfügung gestellt von A. Fischer, PD Dr. K. Becker, Institut für Medizinische Mikrobiologie, Universitätsklinikum Münster)
Reduktion von unspezifischen Bindungen (Spur 5-7)
Nachweis von Enterotoxin A aus Staphylokokken.
Unspezifische Bindungen die zu falsch-positiven Ergebnissen führten, wurden durch LowCross-Buffer® vollständig reduziert.
Nachweis von Enterotoxin A aus Staphylokokken.
Unspezifische Bindungen die zu falsch-positiven Ergebnissen führten, wurden durch LowCross-Buffer® vollständig reduziert.
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